www.365-808.com

在什么条件下应维持不同的酶制剂,维持酶活性

2019-10-04 04:24 小编: 亚洲365bet网址
全部展开
(1)低温保存:大多数蛋白质和酶对热敏感,通常在35°C至40°C的温度下失活。在冰箱中冷藏后,蛋白质和酶越纯净,溶液就越不稳定。
因此,通常将其存储在-5°C?-20°C下,但是如果可以将其存储在-70°C下则是理想的选择。
几乎没有耐热酶。例如,核糖核酸酶可以煮短时间。胰蛋白酶可用稀盐酸耐受90°C。转化酶可以在50°C-60°C下保持15-30分钟,而不会失去活性。
一些酶对低温敏感。例如,来自禽肝的丙酮酸羧化酶在25°C稳定,在低温下失活,过氧化氢酶在0°C-4°C失活,冷冻,冷冻羧肽酶失活,反复融化(2)干粉或晶体的储存:蛋白质和酶固体比溶液稳定得多。
固体干粉制剂可以在干燥剂中长时间保存。例如,干燥的葡萄糖氧化酶粉末可以在0°C下保存2年,在-15°C下保存8年。
通常,酶和蛋白质的水分含量超过10%,并且在室温和低温下很容易失活。如果水含量小于5%,则在37℃下的活性将降低。当抑制微生物活性时,水含量小于10%,并且抑制了化学活性。
另外,必须特别注意在冻干过程中酶有时会被部分灭活的事实。
_(3)在保护剂下储存:在无菌条件下,室温下储存45年的血液,只有少量的血红蛋白发生变化,许多酶非常快地保留了部分活性观察到的蛋白质在血液中的稳定性蛋白质通常会添加一些稳定剂以长时间保存蛋白质和酶:例如:1种惰性生物化学或有机物质:保持稳定的疏水环境,如糖,脂肪酸,牛血清白蛋白,氨基酸和多元醇。
2中性盐:某些蛋白质需要在具有高离子强度(1 mol / L?4 mol / L或饱和盐水)的极性环境中活动。
最常用的是MgSO4,NaCl,(NH4)SO4等。
在使用过程中脱盐。
3硫醇试剂:某些蛋白质和酶的表面或内部含有半胱氨酸巯基。它们很容易通过空气中的氧气氧化为磺酸或二硫化物而变性。为了存储,可以添加半胱氨酸或巯基乙醇。
换句话说,存储样品时必须小心。有关某些常用酶的保存条件,请参见本“生化制备技术”(苏八贤编辑)中几种酶的保存条件和稳定性表。有关生物聚合物和药物的储存条件,请参见生物学和相关文献以及酶学手册。